液相色谱仪的常见故障及对应解决方式
2022-02-22 09:05
液相色谱仪是近几十年发展起来的一种高效、快速的分离分析技术，是现代分离检测的重要工具。高效液相色谱仪是以经典液相色谱仪为基础，引入气相色谱仪的理论和实验方法，将流动相改为高压输送，采用高效固定相和在线检测等手段，发展而成的分离分析技术，具有高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点，成为生物制药领域发展最快、应用最广的现代分析技术之一。
液相色谱仪的常见故障及对应解决方式来了解一下呢？
1、柱压高
原因：缓冲液盐分沉积于柱内;或者是样品污染沉积。
措施：如果是缓冲液盐分沉积于柱内，则用40～50℃的纯水低速正向冲洗柱子，逐渐提高流速冲洗，柱压大幅度下降后再用常温纯水清洗，*后用纯甲醇冲洗柱子30分钟。
如果是样品污染沉积导致，则用纯水反向冲洗柱子，再用甲醇冲洗，随后用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子，再用甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，*后用甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟。
2、气泡溢出
原因：主要是由于过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内，内部霉菌繁殖形成菌团阻塞了过滤器导致。
措施：将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，利用超声清洗既分钟。或者将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时，再用纯水清洗，打开purge键清洗脱气，直到没有气泡冒出。打开泄压阀，打开泵，纯水冲洗过滤器1小时左右。
3、无压力指示，也无液体流过
原因：泵密封垫圈磨损;或大量气泡进入泵体。
措施：更换密封垫圈，或用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。
4、压力波动大，流量不稳定
原因：系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物。
措施：观察流动相的量，动相要充分脱气。如果是单向阀和阀座不能密封，则拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。
5、峰面积重复性不佳
原因：进样阀漏液;或加样针不到位，或者是液量不足。
6、出峰不佳，峰分叉
原因：色谱柱被污染，或者柱头填料塌陷。
措施：色谱柱被污染则需清洗色谱柱。如果柱头填料塌陷或硬结，则去除硬结部分，冲新装入新填料。反复滴甲醇，压紧不锈钢杆，直至填满。柱头用甲醇冲洗干净。
